Deteção de Vibrio cholerae patogénicos associados a doenças de origem alimentar utilizando genes de virulência como alvos de PCR

Abstract

Este estudo teve como principal objetivo a deteção de estirpes patogénicas de Vibrio cholerae associados a doenças de origem alimentar recorrendo a genes de virulência como alvos de PCR. Um outro objetivo deste estudo foi a implementação de um controlo interno de reação (CIR) garantindo a não existência de falsos negativos. O CIR selecionado foi o plasmídeo pUC19 com 118 pares de bases. Foram analisadas 38 amostras de camarão inteiro congelado de venda a granel, recorrendo à Norma ISO 6887-3:2017. As amostras foram adquiridas em 11 superfícies comerciais, representando diferentes proveniências (Equador, Índia, Argentina, Bangladesh, Venezuela, Madagáscar e Moçambique), diferentes calibres e diferentes métodos de produção (aquacultura e meio selvagem). Verificou-se amplificação do fragmento do gene prVC em 9 amostras (24%), confirmando-se como positivas para a pesquisa de Vibrio cholerae. No entanto, nenhuma destas amostras apresentou amplificação dos fragmentos dos genes de virulência ctxA e ctxB. Tendo em conta o país de origem, o maior número de amostras contaminadas pertence à Índia e ao Equador com 3 positivos em 10 amostras analisadas e 5 positivos em 20 amostras analisadas, respetivamente. Já em relação ao método de criação do camarão, das 32 amostras provenientes de aquacultura, 9 testaram positivo a Vibrio cholerae e das 6 amostras de camarão selvagem, nenhuma testou positivo a Vibrio cholerae. Os dados obtidos neste estudo levam-nos a questionar a segurança microbiológica do camarão importado de países onde existe Vibrio cholerae e cujo consumo cru ou mal cozinhado representa um problema de saúde pública.