Degradação fúngica de substratos recalcitrantes : estudo de alguns parâmetros bioquímicos durante a colonização de cortiça pelo Ascomiceta Penicillium glandicola : ergosterol (biomassa) e proteoma fúngico

Abstract

O Penicillium glandicola é um dos fungos presentes nas pranchas de cortiça, e por isso torna-se essencial, principalmente para as corticeiras, o seu estudo ao nível da metabolização dos principais componentes da cortiça. O objectivo deste trabalho de fim de curso foi a compreensão dos mecanismos de colonização da cortiça por fungos através da execução de várias técnicas dispersas por diferentes objectivos. Dentro das técnicas a desenvolver destacou-se a necessidade de optimizar um método para quantificação de ergosterol, por HPLC, a fim de normalizar a biomassa produzida pelo fungo durante a colonização de substratos insolúveis em água. As amostras utilizadas foram obtidas através de culturas sólidas1 semi-sólidas e líquidas e tendo como fontes de carbono, sacarose, cortiça ou glucose. Através dos resultados obtidos, verificou-se que a ergosterol é um bom indicador para a quantificação de biomassa fúngica. Posteriormente, procedeu-se à extracção e separação das proteínas, por electroforese bidimensional, de culturas líquidas com cortiça ou glucose (fracção intracelular e extracelular). A análise do proteoma do fungo expresso na presença de diferentes substratos permite identificar as enzimas especificamente associadas à degradação dos constituintes da cortiça (celulose, lenhina e suberina).