Estudo comparativo do efeito de fixadores histológicos: formol líquido, formol-gel e fixador alcoólico EMA

Abstract

A etapa da fixação constitui uma etapa essencial na rotina de um laboratório de anatomia patológica, assegurando a preservação do material histológico. O formol, é o fixador mais utilizado dada a sua eficácia comprovada, contudo, os riscos associados à sua toxicidade justificam a procura de alternativas mais seguras. Este estudo teve como objetivo comparar o desempenho de diferentes fixadores - formol, formol-gel e etanol-metanol-ácido acético (EMA) - em amostras de tecido de porco, avaliando os seus efeitos macroscópicos e microscópicos. Foram realizadas todas as etapas de uma rotina histológica, com análise da taxa de penetração, dureza e retração tecidular associada a cada fixador, e uma análise microscópica, após as colorações de hematoxilina-eosina, Gomori-Reticulina e Tricrómio de Masson. Os resultados demonstraram que o EMA apresentou a taxa de penetração mais elevada, menor retração e melhor preservação morfológica. Microscopicamente, revelou colorações mais intensas e definição nuclear superior, ao contrário do formol-gel, que se associou a menor difusão e qualidade histológica inferior. Conclui-se que o EMA se perfila como um potencial substituto ao formol, sendo necessários estudos adicionais para avaliar seu desempenho e influência em outras técnicas essenciais, como a imunohistoquímica. Abstract: Fixation represents a critical step in the routine of an anatomical pathology laboratory, as it ensures the preservation of histological material. Formalin remains the most commonly used fixative due to its proven effectiveness, however, the health risks linked to its toxicity underscore the need for safer alternatives. This study aimed to compare the performance of three fixatives—formalin, gelled formalin, and ethanol–methanol–acetic acid (EMA)—in porcine tissue samples, assessing both macroscopic and microscopic effects. All standard histological procedures were performed, including evaluation of penetration rate, tissue hardness, and shrinkage, followed by microscopic analysis after hematoxylin–eosin, Gomori’s reticulin, and Masson’s trichrome staining. EMA demonstrated superior performance, with the highest penetration rate, minimal shrinkage, and improved morphological preservation. Microscopically, it yielded more intense staining and better nuclear definition. In contrast, gelled formalin showed reduced diffusion capacity and lower histological quality. Based on these findings, EMA appears to be a promising alternative to formalin. Nonetheless, further studies are required to investigate its applicability and effectiveness in other key histopathological techniques, particularly immunohistochemistry.